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ELISA特點
免疫酶技術ELISA法是一項先進的免疫化學測定技術,自20世紀60年中期問世70年代初發(fā)展以來,引起了許多學者有關技術人員的重視。這是因為免疫酶技術有其*的優(yōu)點,主要表現(xiàn)在以下幾個方面:
專一性強。抗原與抗體的免疫反應是一專一反應,而免疫酶技術以免疫反應為基礎,所檢測的對象是抗原(或抗體),使用的抗體除標記了酶以外,與普通抗體的免疫反應特性并無多大差別。
1.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應,顯示抗原與抗體的結(jié)合,大大提高了檢測的靈敏性,使檢測水平接近放射免疫測定法。
2.樣品易保存。經(jīng)過酶反應顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定,因此有利于樣品的保存。
3.結(jié)果易觀察。對檢測結(jié)果即可用肉眼觀察,又可用顯微鏡觀察,也可以用分光光度計進行比色測定,還可用顯微鏡觀察。這是因為某些酶反應產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變,從而引起被檢測物的顯示。
4.可以定量測定。溶液中的抗原物質(zhì),應用酶免吸附技術進行比色測定,依據(jù)光密度值的變化,可以定量。預計用細胞分光光度計可對組織內(nèi)的抗原進行免疫酶技術的定量測定。
5.可以大規(guī)模測定樣品。如有成千上萬份樣品需要進行檢測,免疫沒技術都能在較短時間內(nèi)完成。
6.儀器和試劑簡單。對免疫沒技術來說,不需要熒光顯微鏡,也不需要測定放射性的特殊儀器,所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑,普通實驗室及生產(chǎn)應用單位均易購置。
此外,各項免疫酶技術,操作比較簡單,工作人員的操作安全性較高。如果將抗原聯(lián)結(jié)了酶,那么,用所得到的酶標記抗原就可以檢測相應的抗體。
20世紀80年代和90年代,免疫酶技術發(fā)展出現(xiàn)了許多與生物素-親和素、電化學、光學和DHA聚合酶鏈式反應相結(jié)合的新技術,出現(xiàn)了與分子生物學PCR技術交叉聯(lián)合的趨勢,從而擴大了酶免技術的使用范圍,進一步提高了檢測的靈敏度,提高了短時間內(nèi)檢測大量樣品的能力。
經(jīng)過許多科學家和技術人員的努力,免疫酶技術生出許多分支,其中有免疫酶標固相載體方法的酶聯(lián)免疫吸附測定法,及ELISA和dot-ELISA,具有吸附能力的小球狀物載體方法,即DASS等;免疫酶標組織化學法;非標記免疫酶的‘抗體搭橋’法和PAP法以及免疫酶標電鏡技術和非標記免疫酶電鏡技術等。這些技術可以根據(jù)不同的材料和不同的研究課題予以采用。
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